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使用重组酶聚合酶扩增快速、直观地检测猴 B 病毒

09-23 我要评论

宣布在Zoonoses杂志上发表新文章猴 B 病毒 (BV) 感染人类和其他猕猴物种的死亡率约为 80%。由于 BV 通过猕猴咬伤、抓伤和其他伤害感染人类,因此在现场实验室中简单快速地诊断 BV 对于保护兽医、实验室研究人员和支持人员免受感染威胁具有重要意义。

开发了两种带有闭合垂直流 (VF) 可视化条(RPA-VF-UL27 和 RPA-VF-US6)的重组酶聚合酶扩增 (RPA) 测定,其靶向两个保守基因,并与一次性闭合可视化条装置相结合。优化反应条件后比较两种测定的灵敏度和特异性。确定 RPA-VF-US6 在室温下的性能,以评估其在即时 (POC) 测试中的潜力。

RPA-VF-US6 特异性检测阳性质粒对照(而非疱疹病毒核酸),检出限为 28 个拷贝,而 RPA-VF-UL27 与 HSV-1 有交叉反应,但即使是 3.4 个拷贝的质粒标准品也被检测到。通过该测定读出。此外,RPA-VF-US6在室温下具有优异的性能(检测限为2,800个质粒拷贝),表明RPA-VF-US6在POC测试中的潜力。

开发了两种用于 BV 可视化诊断的 RPA 检测方法。RPA-VF-US6是一种简单、快速、特异的BV检测方法。整个反应可以在30分钟内恒温下进行,这表明RPA-VF-US6在无需复杂仪器的现场实验室中进行POC测试的潜力。

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