2.大黄 黄连 : 【中医理论】
大黄2两,黄连1两,名“大黄黄连泻心汤”,见于《伤寒论》。两药都苦寒泄热,大黄,气味重浊,性善下行,泻营分之热;黄连善清热燥湿,泻气分之热。二药相伍,共奏清热泻下之功效。用法:以麻沸汤2升渍之,须臾绞去滓,分温再服。
【化学研究】
不同配伍剂量对大黄、黄连药对有效成分的影响^[1]
1.大黄蒽醌类成分的测定
提取:称取定量药材,加水浸泡1h,煎煮30min(后下,煎10min),抽滤,残渣加水煎煮20ml,抽滤,残渣压榨,合并滤液和压榨液,水浴浓缩至规定浓度[含量测定浓度为10%(g/ml),泻下实验浓度为100%(g/ml)]备用。
含量测定:大黄中蒽醌类成分的测定:采用0.8%醋酸镁为显色剂,以大黄素为标准品,测定大黄和配伍组的蒽醌类成分的含量。黄连在510nm处对大黄蒽醌的测定几乎无影响(T>98%)。标准曲线的绘制:精密称取大黄素4.4mg,加甲醇溶解并定容至10ml,取其定容液0.5ml,加甲醇定容至10ml。精密吸取定容液0.1、0.2、0.8、1.6、3.2、5ml,分别加0.8%醋酸镁甲醇溶液定容至10ml,摇匀,于510nm处测定吸收度,绘制浓度—吸收度曲线,得回归方程为C(μg/ml)=0.0131+18.19Ar=0.9997。游离蒽醌的测定:精密取提取液2.00ml,加氯仿萃取4次,萃液回收氯仿,残渣用少量甲醇溶液,用0.8%醋酸镁甲醇定容至100ml,30min内用分光光度计在510nm处测定吸收度。由回归方程求得样品溶液中游离蒽醌含量,结果见表3-2-1。总蒽醌的的测定:精密取提取液2.00ml,加冰醋酸:25%盐酸(10:2)20ml,沸水浴回流2h,取出放冷,用氯仿萃取4次,萃液回收氯仿,残渣用少量甲醇溶液,用0.8%醋酸镁甲醇溶液定容至100ml,30min内用分光光度计在510nm处测定吸收度。由回归方程求得样品溶液中总蒽醌含量,结果见表3-2-1。结合蒽醌的测定:测得的总蒽醌含量减去游离蒽醌即得样品溶液中结合蒽醌含量,结果见表3-2-1。
实验结果表明,大黄、黄连配伍后,汤剂中蒽醌类成分的溶出率显著降低。黄连的配伍剂量越大,汤剂中蒽醌类的含量越低。
回收率测定:平均值为97.02%±1.89%,n=4。

表3-2-1 汤剂中大黄蒽醌类成分的含量(mg/ml)及与单煎大黄的比较

组别 游离蒽醌
含量 相当大黄
百分率% 结合茵醌
含量 相当大黄
百分率% 总蒽醌
含量 相当大黄
百分率% 大黄
大黄1:黄连0.5
大黄1:黄连1
大黄1:黄连2 0.9845
0.2798
0.1634
0.1214 100
28.42
16.60
12.33 2.044
1.387
1.149
0.8222 100
67.86
56.21
40.23 3.029
1.667
1.312
0.9436 100
55.03
43.31
31.15

2.黄连中小檗碱的测定
用薄层层析与重铬酸钾对照法结合,适于成分复杂的含黄连制剂中的小檗碱测定。经薄层分离,大黄的成分对测定无影响。
精密取提取液10 ml,80℃水浴蒸干,残渣用甲醇溶解并定溶至10 ml,用微量注射器在硅胶板上条形(40 mm×5 mm)点样5μl,在正丁醇-冰醋酸-水(7:1:2)中上行展开15 cm,挥干溶剂后于紫外灯下刮取亮黄绿色小檗碱斑点,置离心管中用40～50℃ 1%盐酸甲醇液10 ml分3次洗脱,合并洗脱液于10 ml容量瓶,加1%盐酸甲醇液至刻度,摇匀后供比色用。另于斑点旁刮取等面积空白硅胶,随行空白。取110℃ 4 h干燥的重铬酸钾20 mg,精密称定,置于100 ml容量瓶中,加5 mmol硫酸至刻度,供比色用。取样品液和重铬酸钾硫酸液,分别以空白硅胶洗脱液和5 mmol硫酸液作为空白对照;于421 nm处测定其吸收度。取黄连样品测定干燥失重,代入公式计算样品溶液中小檗碱的含量,结果见表3-2-2。

表3-2-2 汤剂中小檗碱的含量(mg/g/ml)及与单煎黄连的比较

组别 生黄连 大黄1:黄连0.5 大黄1:黄连1 大黄1:黄连2 小檗碱含量
相当黄连百分率% 7.279
100 0.4444
6.105 1.324
18.19 5.504
75.61

实验结果表明,大黄与黄连配伍后,汤剂中小檗碱的含量急剧下降,且大黄的配伍剂量越大,汤剂中小檗碱含量越低。
上述成分研究证明,大黄-黄连药对在复方煎煮时,由于黄连的小檗碱成分可分别与大黄的鞣质和蒽醌类成分反应生成难溶性沉淀物,结果汤剂中的蒽醌类成分和小檗成分的含量较之单煎药材均有所降低,而且降低的与两药的配伍比例有关,配伍比例相差越大,则被研究成分下降的程度也越大。
【药理研究】
1.抗缺氧作用[2]
1.1 抗常压下致整体缺氧作用
选体重23.45±2.19 g的小鼠20只,随机分为2组,每组10只,试验组每只腹腔注射100%大黄黄连泻心汤水醇法提取液0.2 ml/10 g,对照组只注射等容量生理盐水,15 min后将小鼠放入有10 g钠石灰的25 ml的广口瓶内,每瓶2只,加塞密闭观察小鼠的存活时间。结果试验组存活时间14.32±3.1 min;对照组存活时间8.55±2.3 min。两组存活时间差异非常显著(P<0.01)。
1.2 抗异丙肾上腺素致心肌缺氧作用
选21.75±1.76 g的小鼠30只,随机等分为3组,分别由腹腔注射100%大黄黄连泻心汤水醇法提取液0.2mg/10 g、心得安0.2mg/10g和等容量生理盐水。15min时,3组小鼠均由腹腔异丙基肾上腺素0.075mg/10g,15min后将小鼠置入250ml广口瓶内,记录其密闭后小鼠存活时间,结果见表3-2-3。

表3-2-3 大黄黄连泻心汤抗异丙肾上腺素致缺氧作用

组别 动物数(只) 剂量 存活时间(min) P 生理盐水组 10 0.2ml/kg 10.37±2.65　 心得安组
大黄黄连泻心汤 10
10 0.2ml/kg
0.2ml/kg 13.26±2.40
17.62±4.38 <0.05
<0.01

1.3 抗亚硝酸钠中毒致细胞缺氧作用
选小鼠20只,随机等分为2组,分别腹腔注射100%大黄黄连泻心汤水醇法提取液0.2ml/10g,和注射等容量生理盐水0.2ml/10g,15min后,两组小鼠均由腹腔注射2%亚硝酸钠溶液0.1ml/10g,结果大黄黄连泻心汤组存活时间为25.31±4.6min,对照组存活时间为13.26±2.8min,两组存活时间差异非常显著(P<0.01)。
1.4 抗氰化钾中毒致细胞缺氧作用
选体重19.9±3.0g小鼠20只,随机等分为2组,分别腹腔注射100%大黄黄连泻心水醇法提取液0.2ml/10g和腹腔注射等容量生理盐水,15min后,两组均由腹腔0.1%氰化钾溶液0.1ml/10g。记录两组存活时间,大黄黄连泻心汤组存活时间为5.42±2.05min,对照组存活时间为2.4±0.7min。两组存活时间差异非常显著(P<0.01)。
2.保护胃粘膜作用
以乙醇诱发大鼠胃粘液膜电位差(PD)低下(由于乙醇所致胃的粘膜损害,不一定存在酸),是一种对胃粘膜细胞本身的直接损害。给以该方100mg/kg～250mg/kg,出现抑制损害作用,并与其剂量成正比。以阿司匹林诱发大鼠PD低下,因阿司匹林抑制粘膜液物质的分泌或者合成,构成粘液障碍或破坏粘膜屏障,并存在一程度的酸。给以该方25～100mg/kg则对阿司匹林所致的PD低下呈明显抑制,并与其剂量成正比。还有报道该方对与小鼠水浸制剂引起的应激性溃疡有明显的抑制作用。该方保护胃粘膜的机制是增强防御因子作用和抑制攻击因子作用[3]。
3.抑制胃酸作用
以麻醉大鼠胃内灌流法研究该方对抗由组胺、五肽胃泌素、乙酰胆碱和2-去氧葡萄糖(2-DG)刺激的胃酸分泌的影响,并将其与甲氰咪胍、16-二甲基前列腺素E2(DMPGE2)、阿托品的作用进行比较,结果表明:给以该方100mg/kg,对组胺、乙酰胆碱刺激胃酸分泌作用无影响。但能明显抑制五肽胃泌素和2-DG引起的胃酸分泌,其作用机制与甲氰咪胍、DMPGE2、阿托品不同[3]。
4.抗凝及抗血小板聚集作用
实验结果表明,本方及其不同组合和单味黄连均有抗凝作用,以单味黄连及黄连、黄芩组合较好,单味黄芩和大黄不呈抗凝作用,但两者组合时,则呈协同抗凝效应。在3对组合药品,如药物浓度下降(比例不变),则反而呈现促凝效应。在抗血小板聚集中,除了黄芩仅有促凝集作用外,黄连和大黄均有不同程度地抑制血小板聚集的作用。提示该方具有明显的抗凝及抗血小板聚集作用。各单味药在组合过程中,呈现拮抗、相加及协同作用,随着药物浓度的变化而呈现双相效应[3]。
5.改善高脂血症作用
该方对实验性小鼠高脂血症有改善作用。实验结果表明,该方可改善总胆固醇和动脉硬化指数,降低中性脂肪(甘油三酸酯),使过氧化脂质含量下降,对血清脂蛋白有某种程度效果。该方用于实验家兔,可降低血清胆固醇及磷酯含量,减轻苯肼所致红细胞、血红蛋白及白细胞数量的降低。同时,据组织病理学检查,也可见苯肼所致家兔动脉硬化有一定程度的减轻。该方能降低正常家兔的血脂,并可使高胆固醇饲养兔的血胆固醇/总磷脂的比值下降到正常值。对于切除甲状腺的家兔,其血胆固醇/总磷脂比值上升,给以该方3周后其血胆固醇/总磷脂恢复正常,但对肝功能障碍的家兔则上述作用消失;若将药液和健康兔的空肠或肝组织在体外孵育后再给以,其降脂作用可再现。由此表明该方的降血脂作用与肝脏、空肠的某些因素有关[2]。
6.改善肝肾功能
实验表明,该方改善苯肼致家兔中毒之肝肾功能[3]。
7.抗菌作用
实验表明,该方有较强的抗菌作用,能抑制葡萄球菌的生长,对弗氏痢疾杆菌、大肠杆菌等增多有显著抑制作用,对金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌有抑制作用。
8.提高机体的免疫能力
实验证明,该方可提高体液免疫功能,其方功效对体液免疫、细胞免疫、特异性免疫功能指标,均有显著效应。
【临床应用】
1.治疗呼吸系统疾病
高氏[5]报道用本方治疗急性肺出血105例,病程最短12 d,最长35年,24 h出血量,最少60ml,最多500ml。全部病例经X线检查,诊断肺结核60例,支气管扩张34例,肺癌6例,心血管疾病5例。结果:服药后4d血止者9例,占93.6%。4d以上血止改用西药者8例。并指出本方治疗出血时应注意:肺为娇脏,不任猛烈,故药量宜小(大黄6g,黄芩3g,黄连2g)。武火急煎,则气味俱薄,使病邪去而正不伤,故体虚者亦可酌用。华氏[6]报道用本方加生石膏、生地、栀子等苦寒泻心止血药,治24例大咯血属火热上亢者,确收立即止血之效,但对肺癌咯血效果不好。
2.治疗消化系统疾病
陈氏指出,大黄黄连泻心汤的效用是促进消化,调整胃肠功能。俞氏总结近代应用大黄黄连泻心汤的案例,指出多用于治疗炎性胃肠病。杜氏[7]介绍用泻心汤加减,以大黄、黄连、黄芩、白芍、陈皮炭为基本方。若恶心呕吐者,加竹茹、旋覆花;若心烦、急躁易怒者,加丹皮、栀子;若头晕、汗出、心悸者,加党参、麦冬、五味子。治疗上消化道出血12例(包括胃溃疡、十二指肠球部溃疡、食管静脉破裂等出血)。其中9例5d内血止,2例8d内血止,1例出血不止而改用其他方法。张氏[8]报道本方主治因心中阴气不足,阳气独盛,迫血妄行而吐血、衄血者,疗效显著。但必须辨明病机蝇“气盛火旺”表现在起病暴,突然发作,来势凶猛,血出如喷射,量多色鲜红。反之,病来缓慢,血出缓而少,无高压喷射状,色不鲜红而暗者,禁用本方。
有报道本方治疗HP相关性胃病获良效。
本组病例均经纤维胃镜检查、HP尿素酶快速检测等,确诊为HP相关性胃病。其中男41例,女27例;年龄最小者22岁,最大78岁,平均41岁;病程最短1年,最长22年;慢性胃炎39例,十二指肠溃疡18例,胃溃疡11例。辨证属脾胃湿热31例,肝胃气滞19例,肝郁脾虚7例,脾胃虚寒6例,脾胃阴虚者5例。
以大黄黄连泻心汤为基本方加减治疗。基本方:大黄10g,黄连3g。加减:脾胃湿热,加蒲公英、蛇舌草各30g,丹参、龙葵各15g,藿梗、苏梗、云苓各10g;肝胃气滞,加香附、八月札、郁金各10g,白芍30g,甘草6g;肝郁脾虚,加白术、茯苓、陈皮、藿梗、苏梗、香附各10g,白豆蔻5g;脾胃虚寒,加炙黄芪15g,白芍、桂枝、甘松各10g,肉桂3g;脾胃阴虚,加白芍、乌梅、山楂、沙参各10g,甘草6g,川石斛15g。每日1剂,水煎服,30日为1疗程,疗程结束后复查胃镜并取活检作病理、HP检测。
结果16例痊愈(临床症状消失,胃镜示粘膜象明显改善或溃疡瘢痕期,HP-),37例好转(临床症状基本消失,胃镜示粘膜象有所改善,溃疡面缩小,进愈合期,HP-),5例无效(临床症状无明显减轻,胃镜示胃粘膜病变无改善,HP+)。总有效率为91.38%[9]。
4.治疗五官科疾病
朱氏[10]报道以本方加丹皮、甘草、牛膝,治疗双侧鼻出血21d的患者,服1剂,鼻出血止,2剂后诸症霍然而愈。俞氏认为本方可有于治因热引起的眼病、咽峡充血等。谢氏[11]介绍予泻心汤加味治疗目赤肿痛与耳疖,收效显著。权氏[12]认为巩膜充血疼痛,多为巩膜炎。巩膜色白、充血为火热之邪,巩膜充血为肺经有热。若脉见关上浮者,可用本方清心胃之火热,火热得清,其症自愈。李氏[13]报道应用本方加味治疗小儿急性口疮33例,全部治愈。处方:大黄、黄连、竹叶各3g,黄芩、大青叶各6g,五倍子5g,热甚者加生石膏;津伤者加玄参、寸冬;口腔溃疡巨大者,外用吴茱萸研末醋调敷涌泉穴;体温40℃以上者,结合物理降温;同时适当给予冰硼散吹入口腔表面。服药1d热退者10例,2d热退者16例,3d热退者7例;口疮2～5d内愈者25例,5～7d内愈者8例。洪氏[14]介绍本方加玄参、生地、板蓝根、牛膝、甘草、桔梗治急性扁桃体,3剂而愈。
5.治疗皮肤科疾病
对因热引起的皮肤病,临床常以本方加减治疗。如洪氏[14]报道内服泻心汤加甘草、丹参、板蓝根、银花、连翘,外用金黄散醋调敷,治1例面部疱疹,大小水疱簇起如带,灼痛难忍,纳食减少,便秘尿赤,舌深红,苔黄、脉弦数。服药3剂灼痛减,8剂结痂脱落。
6.治疗其他疾病
殷氏[15]报道以本方加地榆、木香、马齿苋治疗下利赤白脓胨,日十数次,腹痛,里急后重,心烦口渴,食少纳呆,小便短黄,2剂诸症大减,继服3剂痢止病愈。张氏[16]应用本方加味治疗肝性血卟啉病5例,均获痊愈。若湿重呕恶者,加佩兰;腹痛甚者,加元胡、川楝子;腹胀者,加枳实;腑实者,加玄明粉。治愈时间平均5.4d。俞氏认为本方用于突发的充血性疾病,如脑充血、脑溢血,子宫出血和痔疮出血等,可收良效。张氏[17]介绍日人龙野一雄应用本方之经验,谓之治属热实之高血压、卒中、三叉神经等病。赵氏[18]报道本方治疗血证疗效确切。谭氏[19]报道本方可用于治疗进食头部汗出。李氏[20]报道本方可用于治疗戒断综合征。邓氏[21]报道本方治疗慢性肾炎也获良效。王氏[22]报道本方可用于治疗咽喉异物感,78例临床观察多获良效。罗氏[23]报道本方配合西医疗法治疗急性出血坏死性肠炎每获良效。胡氏[24]报道本方治疗胃窦炎常疗效确切。